酶联免疫吸附分析（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）试剂盒是一种基于抗原-抗体特异性结合原理的高灵敏度检测工具，广泛应用于医学诊断、生物学研究、食品安全及环境监测等领域。其核心原理是将抗原或抗体固定在固相载体（如微孔板）表面，通过酶标记的二抗或抗原与目标物结合，利用酶催化底物显色反应，最终通过吸光度值定量或定性分析目标分子。ELISA试剂盒通常包含预包被的微孔板、酶标试剂、标准品、显色液和终止液等组分，具有操作简便、高通量、重复性高等特点。
随着生物技术的快速发展，ELISA试剂盒的检测范围不断扩展，涵盖疾病标志物（如病毒抗原、肿瘤标志物）、激素、细胞因子、过敏原、药物残留等多种目标物。在临床诊断中，ELISA技术被用于传染病筛查（如HIV、肝炎病毒）、自身免疫性疾病检测及妊娠试验等；在科研领域，它是研究蛋白质相互作用和信号通路的重要工具。
ELISA试剂盒的检测项目根据应用需求可分为以下几类：
1. 病原体抗原/抗体检测：如新型冠状病毒（SARS-CoV-2）N蛋白抗原、HIV抗体、乙肝表面抗原（HBsAg）等，用于感染性疾病的早期诊断和流行病学调查。
2. 细胞因子与炎症因子：包括IL-6、TNF-α、IFN-γ等，用于评估免疫状态及炎症反应程度。
3. 激素与代谢标志物：如胰岛素、皮质醇、甲状腺素（T3/T4），用于内分泌功能评估。
4. 肿瘤标志物：如CEA（癌胚抗原）、AFP（甲胎蛋白）、PSA（前列腺特异性抗原），辅助癌症筛查与疗效监测。
5. 食品安全与环境污染物：如黄曲霉毒素、农药残留、重金属离子检测等。
ELISA试剂盒根据反应模式主要分为以下四类：
1. 双抗体夹心法：适用于大分子抗原检测，需使用两种特异性抗体（捕获抗体和检测抗体），抗原被夹在中间形成复合物，常用于细胞因子和病毒抗原检测。
2. 间接法：主要用于抗体检测，抗原包被于固相载体后与样本中的抗体结合，再利用酶标二抗进行信号放大。
3. 竞争法：适用于小分子半抗原检测（如激素、药物），样本中的目标物与酶标抗原竞争结合有限抗体，信号强度与目标物浓度呈负相关。
4. 捕获法（IgM检测）：通过预包被IgM抗体捕获样本中的IgM，再以抗原和酶标抗体进行检测，用于早期感染诊断。
为确保ELISA试剂盒检测结果的准确性和可比性，需遵循以下标准化要求：
1. 灵敏度与特异性：检测下限（LOD）需达到国家或行业标准（如中国药典、ISO 13485），且交叉反应率应低于5%。
2. 精密度验证：批内和批间变异系数（CV）需分别小于10%和15%，通过重复性试验和中间精密度试验验证。
3. 校准曲线与线性范围：标准品的浓度梯度需覆盖检测动态范围，相关系数（R²）应≥0.99。
4. 质控品要求：每批次检测需包含阴性质控、阳性质控和空白对照，质控值需落在预设范围内。
5. 国际认证参考：部分高端试剂盒需符合FDA 510(k)、CE-IVD或WHO生物标准化要求。
